中檢維康iELisa嘔吐毒素檢測ELISA試劑盒

中檢維康iELisa嘔吐毒素檢測ELISA試劑盒

1. 概要

嘔吐毒素也稱為脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON），是由串珠鐮刀菌、輪狀鐮刀菌以及多育鐮刀菌等產生的真菌毒素，大多存在于糧谷、飼料及其制品中。中毒后影響消化系統和神經系統，主要表現為嘔吐、頭痛、頭暈、腹痛、腹瀉等癥狀。我國標準規定：玉米、大麥、小麥及其制品中嘔吐毒素不得超過1mg/kg，豬、犢牛、泌乳期動物配合飼料中嘔吐毒素不得超過1mg/kg，牛、家禽配合飼料中嘔吐毒素不得超過5mg/kg。

1. 原理

測定的基礎是抗原-抗體反應。微孔板上包被有抗抗體。加入嘔吐毒素（DON）標準品或樣品、酶標抗原和抗體后，游離的嘔吐毒素與酶標抗原競爭結合抗體，抗體或抗體結合物與固定在微孔板上的抗抗體再結合，沒有結合的標準品、酶標抗原及抗體被洗去，加入TMB底物顯藍色，加入終止液后顏色由藍變黃，用酶標儀在450nm處檢測，吸光值與樣品中嘔吐毒素含量成負相關，與標準曲線比較即可得出嘔吐毒素的含量。

1. 試劑盒的組成

1. 包被有抗抗體的96微孔板：1塊（96 孔，12 條×8 孔）

1. DON標準品：0ng/mL 、10ng/mL、

40ng/mL、100ng/mL、250ng/mL 1 瓶 × 1.0mL

1. DON抗體：              1 瓶 × 10mL

2. DON酶標抗原：           1 瓶 × 10mL

3. 10× 濃縮洗滌液：         1 瓶 × 50mL

4. DON稀釋緩沖液A：        1 瓶 × 50mL

5. DON稀釋緩沖液B：        1 瓶 × 50mL

6. 顯色底物TMB：           1 瓶 × 17mL

7. 終止液：                 1 瓶 × 7mL

8. 試劑盒說明書：           1份

9. 質檢報告：               1份

1. 需要的儀器、試劑

1. 儀器

1. 酶標儀 450nm（iELisa全自動酶標儀或相當者）

2. 微量移液器：20μL-200μL單道，100μL-1000μL單道, 50μL-300μL八道

3. 多功能旋轉混合器（或者搖床、高速均質器）

4. 酶標板振蕩器

5. 渦旋混合器

6. 離心機

7. 50mL離心管

8. 1.5mL離心管

9. 定性濾紙

10. 過濾漏斗

11. 天平：感量0.01g

1. 試劑

1. 純水（蒸餾水、去離子水）

1. 適用樣品

谷物（玉米、小麥、大麥、大米、大豆）：

飼料（高靈敏度）：

飼料：

發酵液：

尿液樣品：

 注意事項

1. 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會導致數值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現板孔干燥過久的情況，則會出現標準曲線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板排干后應立即進行下一步操作。

3. 標準物質和顯色液對光敏感，避免直接暴露在光線下。

4. 混合要均勻，洗板要*（包括加樣品和標準液的時候都必需充分混合均勻）。

5. 終止液為強酸性物質，避免接觸皮膚。

6. 不要使用過了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會引起測定結果不準確。

7. 試劑盒的儲存條件是2-8℃，切勿冷凍。

中檢維康iELisa嘔吐毒素檢測ELISA試劑盒

性能指標

1. 檢測限LOD: 谷物0.15ppm（mg/kg），飼料0.25ppm（mg/kg），發酵液0.15ppm（mg/kg）,尿液0.05ppm（mg/kg）。（LOD：空白樣品測定值+2倍標準偏差SD）

2. 定量限LOQ: 谷物0.25ppm（mg/kg），飼料0.5ppm（mg/kg），發酵液0.25ppm（mg/kg）,尿液0.1ppm（mg/kg）。

3. 定量檢測范圍：谷物0.25-6.0ppm，飼料0.5-12.0ppm，發酵液0.25-6.0ppm,尿液0.1-1.0ppm。