免疫磁珠技術之黃曲霉毒素總量免疫磁珠試劑盒介紹

黃曲霉毒素總量免疫磁珠試劑盒

       （產品編號：IMB103）   

使用對象：

黃曲霉毒素總量免疫磁珠試劑盒能夠特異性的純化與濃縮樣品中的黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2。免疫磁珠試劑盒與磁珠自動工作站搭配使用，該方法速度快、操作簡單、準確性高，對準確靈敏的測定樣品中中的黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2起到十分重要的作用。

黃曲霉毒素磁珠試劑盒廣泛地應用于糧食、食品、飼料、堅果、花生、醬油、醋、辣椒、胡椒、藥材和酒類等樣品的凈化。

原理

樣品經提取液提取、過濾后，放入鍵合有黃曲霉毒素特殊抗體的磁珠中。此時，黃曲霉毒素被免疫磁珠中的抗體特異性的吸附，用洗液將磁珠上的雜質除去，然后用洗脫液將黃曲霉毒素從磁珠上洗脫下來。最后，用HPLC或熒光計等儀器進行定量檢測。

儲存條件

該磁珠試劑盒保存在2-8 °C條件下，絕對不能冷凍，保質期為18個月。建議在室溫（18-30°C）下使用。

實驗溶液制備

1)       提取液，甲醇/水（7+3）：取70mL甲醇加30mL水，混合均勻。

2)       標準溶液的配制：取黃曲霉毒素混標（G1010，B1和G1為1.0ug/mL,B2和G2為0.3ug/mL），甲醇或50%甲醇水為稀釋液，配制標準品溶液。例如：取100uL標準品原液于10mL容量瓶中，用10mL甲醇或50%甲醇水定容至10mL，那么，黃曲霉毒素B1和G1為10ng/mL，黃曲霉毒素B2和G2為3ng/mL.

    注：配制好的標準品溶液2-8℃冷藏保存有效期為24h。

液相色譜條件

    色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）

流動相：甲醇-水（45+55，v/v）

流速：0.8mL/min

檢測器：熒光檢測器，激發波長360nm,發射波長440nm

進樣體積：10uL（建議＜20 uL）

光化學衍生化系統：光化學衍生器有兩接口（不分進出），分別與色譜柱出口或熒光檢測器進口連接

分析步驟

1.0糧谷、植物油、花生等

1.1樣品提取

1.1.1準確稱取試樣5.0g于50mL離心管中，準確加入20.0mL甲醇-水（7+3），以均質器高速攪拌提取3min或高速渦旋提取儀提取15min。

1.1.2用Clover-C式過濾杯過濾，備用；或微纖維濾紙過濾，備用。

1.2樣品的凈化

1.2.1將磁珠試劑盒上蓋打開，放于專用架上。

1.2.2 準確吸取2.0 mL處理好的樣品濾液注入試劑盒樣品孔中（結合液孔），混勻。

1.2.3 將試劑盒放入到CLOVER免疫磁珠自動工作站內。選取AFTest-1 實驗方法，儀器執行自動凈化處理，凈化程序大約20min完成。

1.2.4 處理完成后，將試劑盒取出，放于專用架上。

1.2.5 用移液器吸取洗脫液孔中洗脫液，用有機濾膜過濾到進樣瓶中，注入HPLC或LC/MS檢測。

或準確吸取500uL純水加入到洗脫液孔中，混勻；用有機濾膜過濾到進樣瓶中，注入HPLC或LC/MS檢測。

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需要準備的設備及試劑